犬冠状病毒与犬细小病毒双重荧光定量 PCR 检测方法的建立

作者：傅宇飞; 李传峰; 田传龙; 李泽贤; 麦嘉迅; 程松; 刘禹含; 孟春春; 朱杰; 程**^*; 刘光清^*

来源：中国动物传染病学报, 2023, 1-10.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20230506.001

• 犬冠状病毒
• 犬细小病毒
• 双重荧光定量PCR
• 鉴别诊断

根据GenBank中犬冠状病毒(CCoV)和犬细小病毒(CPV)已有基因序列设计其对应引物，通过对反应体系和扩增程序的优化，建立了CCoV和CPV双重荧光定量PCR检测方法，评估了其敏感性、特异性和重复性。结果显示，该方法最佳退火温度为60℃，引物浓度分别为CCoV 1.0 μmol/L和CPV 0.1 μmol/L，检测下限均为102 copies/μL。批内与批间的变异系数均小于2%。该方法用于检测犬腺病毒(CAV)、犬圆环病毒(CaCV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬流感病毒(CIV)、犬副流感病毒(CPIV)均无特异性扩增。对68份临床样品的检测，结果表明CCoV阳性率为22.0%，CPV阳性率为61.8%，与普通PCR检测结果相比，本研究建立的方法更加灵敏。本研究建立的CCoV和CPV检测方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点，可用于对CCoV和CPV的鉴别诊断。

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所; 同济大学; 江苏科技大学