摘要

目的探讨N端α位乙酰基转移酶10(Naa10)在甲状腺癌中的表达及对TPC-1甲状腺癌细胞中可溶性Fas受体(sFas)表达的影响。方法蛋白质印迹法(Western blot)及实时荧光定量-聚合酶链反应(Real-time PCR)检测甲状腺癌及癌旁组织中Naa10蛋白及mRNA表达, 将TPC-1细胞随机分为siRNA Naa10(siRNA组)和siRNA NC组(对照组), 培养48 h, Western blot及Real-time PCR检测Naa10蛋白及mRNA表达, MTT法检测细胞活力, 细胞克隆形成实验检测细胞克隆能力, Hoechst染色检测细胞凋亡, 酶联免疫吸附法(ELISA)及Real-time PCR法检测sFas、sFas配体(sFasL)蛋白及mRNA表达, Western blot法检测剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved Caspase)-3、cleaved Caspase-8、cleaved Caspase-9蛋白表达, 组间比较采用t检验。结果癌症组Naa10蛋白及mRNA表达量高于癌旁组(0.78±0.07比0.32±0.03, t=5.368, P<0.05;1.85±0.17比1.00±0.11, t=5.743, P<0.05)。siRNA组Naa10蛋白、mRNA表达量、细胞活力、细胞克隆数目、sFas蛋白、mRNA表达量、sFasL蛋白、mRNA表达量低于对照组(0.08±0.00比0.43±0.04, t=5.652, P<0.05;0.28±0.02比1.00±0.10, t=5.468, P<0.05;0.33±0.03比0.48±0.05, t=4.742, P<0.05;134.51±13.45比26.37±2.65, t=4.892, P<0.05;17.36±1.43比45.08±3.57, t=5.897, P<0.05;0.24±0.02比1.00±0.09, t=5.213, P<0.05;21.36±2.30比40.09±4.10, t=4.686, P<0.05;0.26±0.02比1.00±0.10, t=5.942, P<0.05)。siRNA组细胞凋亡率、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-8、cleaved Caspase-9蛋白表达量高于对照组[(38.46±3.75)%比(5.86±0.59)%, t=5.903, P<0.05;0.56±0.06比0.24±0.02, t=4.652, P<0.05;0.68±0.07比0.23±0.02, t=5.984, P<0.05;0.85±0.08比0.27±0.03, t=5.321, P<0.05]。结论下调Naa10表达能够通过抑制sFas及sFasL表达诱导TPC-1甲状腺癌细胞凋亡。

  • 单位
    齐齐哈尔医学院