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摘要
背景与目的：长链非编码RNA 909 (LINC00909)是一个新发现的长度约为2 kb的长链非编码RNA(lncRNA)，在胶质瘤和白血病中被报道发挥癌基因的作用。然而LINC00909在胰腺癌中的作用鲜有报道。本研究旨探讨LINC00909在胰腺癌中的表达及其对患者预后的影响，以及LINC00909与其调控网络对胰腺癌细胞生物学行为的影响。方法：通过Ualcan在线分析LINC00909在TCGA数据库中24种肿瘤组织中的表达情况。通过Linked Omics在线分析LINC00909在176例胰腺癌中的表达及预后情况。利用lncRNA-miRNA结合数据库（star Base）及3个miRNA-mRNA结合数据库（miRmap、 miRanda和Target Scan），预测LINC00909的靶microRNA(miRNA)以及靶miRNA下游的mRNA，并构建LINC00909-miRNA-mRNA网络。用R语言“limma”包对癌旁和癌组织的miRNA进行表达差异对比分析。利用R语言“survival”包、“survminer”包及“ggstatsplot”包，对所得到的基因进行生存分析及相关性分析。在胰腺癌PANC-1细胞上，用敲减实验（转染LINC00909 siRNA）分析LINC00909对PANC-1细胞增殖、迁移及侵袭的影响；用回复实验（同时转染LINC00909 siRNA与靶miRNA抑制剂）及验证LINC00909与靶miRNA之间的靶向关系。用双荧光素酶报告基因实验验证靶miRNA与LINC00909以及下游mRNA之间的互作关系。结果：Ualcan分析表明LINC00909在胰腺癌组织中低表达。Linked Omics分析表明LINC00909低表达患者的预后差（P<0.05）。通过star Base数据库获得28个与LINC00909结合的miRNA，进一步通过对TCGA胰腺癌miRNA表达数据分析发现，只有miR-194-5p在胰腺癌中表达明显上调。通过miRmap、miRanda和Target Scan数据库获得114个与miR-194-5p结合的潜在mRNA。进一步对114个mRNA进行表达相关性分析及生存分析，获得4个mRNA (DACH1、SOCS2、STX16及SNAP91)，最终获得LINC00909-miR-194-5p-DACH1/SOCS2/STX16/SNAP91的ceRNA网络。敲减实验显示，LINC00909低表达组PANC-1细胞的增殖活力增加、划痕愈合率、迁移与侵袭细胞数均较对照组明显升高（均P<0.05）。回复实验表明，回复组DACH1 mRNA的表达水平升高，且细胞的增殖活力、划痕愈合率、迁移与侵袭细胞数均较LINC00909低表达组明显降低（均P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验表明，miR-194-5p模拟物能够抑制含有其结合位点的LINC00909和DACH1质粒的荧光素酶活性（均P<0.05）。结论：LINC00909在胰腺癌组织中低表达且发挥抑癌作用，其可能通过靶向调控miR-194-5p/DACH1轴来抑制PANC-1细胞的增殖、迁移及侵袭能力。
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