原子转移自由基聚合修饰银丝固定化酶反应器的制备及在蛋白质组鉴定中的应用

作者：周廉淇; 张姣; 田芳; 张养军; 钱小红

来源：色谱, 2013, (04): 355-361.

• 原子转移自由基聚合反应
• 蛋白质组学
• 质谱
• 固定化酶反应器
• 银丝 atom transfer radical polymerization
• proteomics
• mass spectrometry(MS)
• trypsin immobilized reactor
• silver wire

针对传统溶液酶解存在的酶解时间较长、酶自切物干扰以及蛋白酶不能重复使用等缺陷,通过电子转移生成催化剂的原子转移自由基聚合法修饰银丝,并以其为载体制备了一种新型的固定化酶反应器。用质谱考察了银丝固定化酶反应器(SW-Trypsin)的酶解效率、重复性和回收率。结果表明:绒毛状聚合物修饰的SW-Trypsin的酶解效率较高,酶解标准蛋白牛血清白蛋白(BSA)20 min后,肽段的氨基酸序列覆盖率可达93%,高于传统溶液酶解方法酶解16 h所得79%的覆盖率。使用该固定化酶反应器于一个月内8次酶解BSA所得的氨基酸序列覆盖率在89%到97%之间,平均覆盖率为94%,显示出良好的稳定性。另外,该固定化...

• 单位
  北京蛋白质组研究中心; 蛋白质组学国家重点实验室; 军事医学科学院放射与辐射医学研究所; 安徽医科大学