苦参碱对LPS激活的小胶质细胞炎症因子释放和CX3CR1蛋白表达的影响

作者：王业丰; 姚遥; 杨欣河; 邹彬; 李佳; 李娟^*

来源：宁夏医科大学学报, 2022, 44(11): 1081-1087.

DOI：10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2022.11.001

• 苦参碱
• 小胶质细胞
• 脂多糖
• CX3CR1
• 经典活化/替代活化
• 炎症

目的 探讨苦参碱对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活的小胶质细胞炎症因子释放和CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1)蛋白表达的影响。方法 选择小胶质N9细胞系，将细胞分为Control组、苦参碱(10μmol·L-1)组、LPS(300 ng·mL-1)组、LPS+苦参碱(0.1、0.3、1.0、3.0、10.0μmol·L-1)组以及LPS+米诺环素(minocycline,MINO)(30μmol·L-1)组。MTT法检测各组细胞的细胞存活率；ELISA法测定活性氧(ROS)和炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E2(PGE2)的表达；免疫荧光法测定M1/M2极化标记物CD32与CD206的表达；Western blot与免疫荧光检测CX3CR1的表达。结果 MTT实验结果显示：0～100μmol·L-1的苦参碱以及0～10μg·mL-1的LPS对N9细胞活力无影响(P=0.9828,P=0.7107);LPS刺激亦未降低经苦参碱预处理的N9细胞的细胞存活率(P=0.7445)。ELISA实验结果显示：与Control组相比，LPS组的ROS、IL-6、PGE2水平均升高(P均<0.01)；与LPS组相比，LPS+苦参碱组ROS、IL-6、PGE2水平均下降(P均<0.01)。免疫荧光结果显示：与Control组相比，LPS组CD32的相对荧光强度升高，CD206相对荧光强度降低(P均<0.01)；与LPS组相比，LPS+苦参碱组CD32相对荧光强度下降，CD206相对荧光强度升高(P均<0.001)。Western blot与免疫荧光检测结果显示：与Control组相比，LPS组的CX3CR1水平降低(P<0.05)；与LPS组相比，LPS+苦参碱组CX3CR1水平升高(P<0.05)。结论 苦参碱能够抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症因子释放，抑制小胶质细胞的M1型极化，促进小胶质细胞向M2表型转化，并上调CX3CR1的表达。

• 单位
  基础医学院; 宁夏医科大学