原花青素通过上调SIRT1表达抑制NF-κB通路减轻脂多糖诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎症反应

作者：王运帷; 杨花; 王志红; 杨云舒^*; 刘洋^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2023, 39(10): 878-883.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009640

• 原花青素
• 脓毒症
• 巨噬细胞
• 沉默信息调节蛋白1(SIRT1)
• 核因子κB p65 (NF-κB p65)

目的 探索原花青素(PC)对脂多糖(LPS)诱导下的RAW264.7细胞炎症反应的调控作用及可能机制。方法 培养RAW264.7巨噬细胞，分别加入PBS及不同浓度PC处理24 h后，添加1μg/mL LPS继续处理6 h。采用实时定量PCR检测RAW264.7巨噬细胞中白细胞介素1β (IL-1β)、 IL-6、单核细胞趋化蛋白1 (MCP-1)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)、 IL-4、精氨酸酶1 (Arg1)的mRNA表达；采用流式细胞术检测PBS组、 LPS组及PC联合LPS组对巨噬细胞M1、 M2型极化的影响；采用Western blot法检测不同浓度PC处理后沉默信息调节蛋白1(SIRT1)、核因子κB p65 (NF-κB p65)与乙酰化的NF-κB p65(Ace-p65)的蛋白表达；采用免疫共沉淀实验检测PC处理巨噬细胞后SIRT1与NF-κB p65的结合效应。结果 与PBS组相比，PC组中巨噬细胞促炎因子IL-1β、 IL-6、 MCP-1、 TNF-α的mRNA表达降低，抑炎因子IL-4、 Arg1的mRNA表达升高。与LPS组相比，PC联合LPS组可显著抑制巨噬细胞M1型极化，促进M2型极化。随着PC浓度的增加，SIRT1表达呈现上调趋势，NF-κBp65蛋白未表现出显著变化，Ace-p65蛋白在高浓度PC处理时表达显著降低。PC处理可显著增强SIRT1与NF-κBp65的结合效应。结论 PC可通过上调SIRT1的表达，抑制NF-κB通路，减轻LPS诱导RAW264.7巨噬细胞炎症反应。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学; 第一附属医院烧伤与皮肤外科