HIF1α通过启动ALKBH5调控整合素蛋白αν表达的机制研究

作者：周丽颖; 张宇迪; 王丽; 王树玉^*

来源：中华生殖与避孕杂志, 2023, 43(04): 371-380.

DOI：10.3760/cma.j.cn101441-20220130-00051

• 子宫内膜容受性
• 缺氧诱导因子 1α
• ALKBH5
• N6-甲基腺苷甲基化
• 整合素蛋白αν

目的探索缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α, HIF1α)启动N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine, m6A)去甲基化酶ALKBH5改善子宫内膜容受性分子标志物整合素蛋白αν(integrin αν, ITGAV)表达的内在机制。方法利用人子宫内膜癌Ishikawa细胞, 低氧以及干扰HIF1α条件下实时荧光定量PCR(real time quantity PCR, RT-PCR)或Western blotting检测ALKBH5的表达;过表达或干扰ALKBH5表达后, RT-PCR或Western blotting检测对ITGAV基因和蛋白表达的影响;荧光素酶报告基因系统分析miR-136-5p靶向ITGAV mRNA表达;RNA pull-down分析及m6A甲基化检测ALKBH5与miR-136-5p竞争性结合ITGAV mRNA上甲基化位点序列。结果低氧条件下HIF1α时间依赖性促进ALKBH5蛋白在Ishikawa细胞中的表达。过表达ALKBH5后, ITGAV的表达水平升高(P<0.001), Ishikawa细胞增殖能力增强(P<0.001);ALKBH5敲除后, ITGAV的表达水平降低(P<0.001), Ishikawa细胞的增殖能力下降(P=0.019)。miR-136-5p靶向调节ITGAV mRNA后, ITGAV mRNA(P=0.007)和蛋白表达水平(P=0.015)下调。miR-136-5p靶向调节ITGAV的序列与ALKBH5所识别的甲基化位点所在序列重叠, 两者在调控ITGAV mRNA上存在竞争性。结论 HIF1α通过调控ALKBH5, 竞争性地结合miR-136-5p所靶向的ITGAV mRNA上特定序列, 精细化调节ITGAV的表达, 改善子宫内膜容受性。

• 单位
  首都医科大学附属北京妇产医院