摘要
目的探究C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(CTRP6)在小鼠卵巢中的定位、表达以及FSH对其调控作用。方法免疫组化对56日龄小鼠卵巢中的CTRP6蛋白进行定位,实时定量PCR检测3 d、10 d、21 d和56 d小鼠、21日龄小鼠注射了孕马血清促性腺激素(PMSG)0 h、12 h、36 h、48 h及注射HCG 4 h、8 h、12 h卵巢中CTRP6 mRNA的表达水平。分别向人卵巢颗粒细胞(KGN)中加入0 ng/ml、1 ng/ml、10 ng/ml和100 ng/ml的FSH和LH,培养24 h后检测CTRP6 mRNA水平。结果小鼠卵巢免疫组化结果显示CTRP6可以在颗粒细胞和卵母细胞中表达,尤其在窦卵泡颗粒细胞中表达水平较高。另外,小鼠CTRP6 mRNA的表达水平随着年龄增加而升高(P<0.05),且经PMSG处理不同时长后,CTRP6 mRNA相对表达量较PMSG处理前显著增加(P<0.05),而与PMSG处理48 h比较,HCG处理后CTRP6 mRNA的相对表达水平显著降低(P<0.05),且随着处理时间的延长呈降低趋势。不同浓度梯度(1、10、100 ng/ml)的FSH处理KGN细胞24 h后均使CTRP6 mRNA表达水平显著增高(P<0.05),浓度为10 ng/ml时CTRP6 mRNA水平达峰值。选择10 ng/ml FSH于不同时间梯度(6、12和24 h)处理KGN细胞后,CTRP6 mRNA相对表达量均较未处理前显著增加(P<0.05),且随着时间延长呈升高趋势。不同浓度梯度(1、10、100 ng/ml)的LH处理KGN细胞24 h后,CTRP6 mRNA的表达均较LH处理前无显著差异(P>0.05)。结论 CTRP6可能参与了卵泡生长发育的调控,是卵泡形成的重要因子。
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单位武汉大学人民医院