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摘要
目的 探讨白细胞介素-1受体相关激酶（interleukin-1 receptor associated kinase,IRAK）在细菌脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的气道黏液高分泌中的作用及其机制。方法 采用特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染，下调Toll样受体（Toll-like receptor,TLR）-4、IRAK在人气道上皮细胞株BEAS-2B中的表达，采用逆转录–聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）检测细胞内黏蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)mRNA转录水平，酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测细胞上清液中MUC5AC分泌量。利用蛋白印迹法检测胞内信号蛋白IRAK磷酸化水平及核因子（nuclear factor,NF）-κB p65的核转位情况。结果 经LPS刺激后BEAS-2B细胞内IRAK磷酸化水平显著增高，使用siRNA下调TLR-4表达，可部分降低IRAK磷酸化水平（P<0.05）；经LPS刺激，NF-κB p65趋向核内分布，使用siRNA下调TLR-4或IRAK可部分削弱NF-κB p65核内分布（P<0.05）;RT-PCR及ELISA结果也显示，经LPS刺激后TLR-4缺陷株MUC5AC mRNA转录水平（0.36±0.05）、分泌量[（0.33±0.04）μg/L],IRAK缺陷株MUC5AC mRNA转录水平（0.48±0.05）、分泌量[（0.42±0.05）μg/L],IRAK激酶抑制剂组MUC5AC mRNA转录水平（0.57±0.07）、分泌量[（0.51±0.06）μg/L]均分别低于野生型BEAS-2B组[0.82±0.09,(0.76±0.09)μg/L；均P<0.05]。结论 IRAK作为TLR受体依赖信号通路上游的重要调控蛋白，参与LPS诱导的气道黏液高分泌。
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