摘要

本研究从Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物、模板5种因素对蚕豆序列相关扩增多态性(sequencerelated amplified polymorphism, SRAP)体系进行了优化。结果表明,蚕豆最佳PCR反应体系(25μL)为:1.0 mmol/L d NTPs,0.5 mmol//L Mg2+,0.4 U Taq酶,4.0 mmol/L引物,2.0 mmol/L的模板。反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸1 min,35个循环;72℃延伸5 min,4℃保存。利用优化的SRAP标记对12份蚕豆材料进行遗传多样性分析,研究结果表明12个材料明显聚为2个类群,类群中又有亚类。12个蚕豆品种中有些虽然来自同一地区,但亲缘关系却较远,而来自不同地区的蚕豆也显示出来很大差异,说明蚕豆材料具有丰富的遗传多样性。