钙调蛋白磷酸酶B亚基生物学活性检测方法建立

作者：史新昌; 杨欢; 徐莉; 李翔; 黄宗文; 韩宇东; 魏群; 饶春明

来源：中国科学:生命科学 , 2016, 46(06): 751-755.

DOI：10.1360/05scls-2015-0371

• 钙调蛋白磷酸酶B亚基
• 生物活性
• 方法建立
• 方法验证
• 质量控制

建立钙调蛋白磷酸酶B亚基(calcineurin subunit B,CNB)生物活性检定方法用以质量控制.CNB能促进钙调蛋白磷酸酶A亚基(CNA)的突变体CNAΔ316的活性,增强其分解底物对硝基苯磷酸二钠(p-nitrophenylphosphate,p NPP)的能力.采用四参数方程对不同浓度CNB和相应的p NPP最大分解速率进行拟合,用平行线分析法对供试品和参考品进行量值传递,得到供试品的活性值.然后对该方法的准确度、精密度、线性、线性范围、灵敏度、特异性和耐久性进行验证.回收率结果均在98%以上,板内精密度为6.7%,板间精密度为10.8%,决定系数大于0.98,线性范围为0.0550μg/m L,灵敏度为50μg/m L.部分细胞因子无法促进CNAΔ316分解底物p NPP的能力.在一定范围内,CNAΔ316浓度对检测结果没有影响.

• 单位
  北京师范大学; 海口奇力制药股份有限公司; 生命科学学院; 中国食品药品检定研究院