MiRNA-29调控B细胞转位基因2在肝癌细胞X线照射中的作用研究

作者：魏磊; 张志敏; 李琼; 毛必静; 罗佳; 王阁

来源：华南国防医学杂志, 2017, 31(04): 219-224+235.

DOI：10.13730/j.issn.1009-2595.2017.04.001

• 肝细胞肝癌
• 逆转录聚合酶链式反应
• 转染
• X线

目的探讨miRNA-29调控B细胞转位基因2（B cell translcoation gene 2,BTG2）表达并初步研究二者在肝癌细胞X线照射后的作用。方法利用miRNA芯片技术寻找肝癌HepG2与正常肝LO2细胞之间miRNAs表达差异;生物信息学软件预测靶向结合BTG2的人miRNAs;构建miRNA-29a/b/c的miRNA模拟物和miRNA抑制物,分别转染293细胞和HepG2细胞,逆转录聚合酶链式反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）检测BTG2在两种细胞中的表达;在HepG2细胞中,给予2、4、8、16Gy剂量X线照射细胞48 h后,实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测miRNA-29表达,Western blot检测BTG2表达。结果利用miRNA芯片技术发现与正常肝LO2细胞相比,miRNAs在HepG2细胞中表达有显著差异,其中66个上调和88个下调,miRNA-29在HepG2细胞中表达显著低于LO2细胞;生物信息学预测发现BTG2基因可能是miRNA-29的靶基因;miRNA-29模拟物分别转染293细胞和HepG2细胞后,BTG2表达降低,而miRNA-29抑制物分别转染细胞后,BTG2表达增加;在HepG2细胞中,给予2、4、8、16Gy剂量照射细胞48 h后,miRNA-29随照射剂量增加表达降低,其中16Gy照射组miRNA-29表达较未照射组（对照组）显著降低（P<0.05）;BTG2表达与之相反,其表达随照射剂量增加而增高,其中16Gy照射组BTG2表达较未照射组显著性增高（P<0.05）。结论高剂量X线照射肝癌细胞后miRNA-29与BTG2表达相反,BTG2可能是miRNA-29调控直接靶基因。

• 单位
  第三军医大学大坪医院; 解放军武汉总医院