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摘要
为研究甜樱桃果胶裂解酶（pectate lyase， PL）基因与其果实软化的关系，本研究利用同源克隆的方法，从常规品种‘红灯’果实中对果胶裂解酶基因进行克隆，并对其序列进行分析，利用RT-qPCR检测该基因在常规型甜樱桃品种‘红灯’和硬肉型品种‘9-19’不同发育时期果实中的相对表达量。结果表明，获得的PaPL5基因编码框全长为1 206 bp，编码401个氨基酸，与甜樱桃基因组预测的PL5基因序列完全一致，其编码的氨基酸序列与东京樱花、扁桃和毛桃PL5序列的相似度在98%～99%之间。进化分析结果表明，PaPL5与扁桃和毛桃同源序列的亲缘关系较近，与核桃的较远。通过序列分析推测PaPL5蛋白为碱性亲水性蛋白，具有大量的无规则卷曲。此外，硬肉型品种‘9-19’在果实成熟后期硬度和基因表达量均高于常规型品种‘红灯’，表明PaPL5基因在果实软化中起着一定的作用。随着果实发育，果实硬度逐渐下降，荧光定量结果显示PaPL5基因表达量呈现先降低后升高的趋势，猜测是该基因在发育的后期已不再起果实软化的决定性作用。PaPL5基因表达量与果实硬度高度相关，该基因可能是调控甜樱桃果实成熟的关键基因。本研究为深入研究该基因在甜樱桃果实成熟中的功能提供一定的参考。
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单位烟台大学; 生命科学学院; 山东省烟台市农业科学研究院
