MMP-9反义RNA真核表达载体的构建及鉴定

作者：唐琳; 陈奎生; 张岚; 张云汉; 高冬玲

来源：山东医药, 2005, (16): 13-14.

• MMP-9
• 表达载体
• 反义
• 基因克隆 MMP-9 Expression vector Antisense Gene clone

目的构建MMP-9反义RNA真核表达载体。方法提取胃癌组织总RNA,按照GenBank中检索的MMP-9基因cDNA序列,设计并合成反义MMP-9基因片段引物,进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),先将扩增产物克隆至pGEM-T载体,再将其反向亚克隆到真核表达质粒pcDNA3.1中,然后对阳性克隆进行酶切鉴定和测序分析。结果PCR扩增出的反义片段与预期长度相符。构建的MMP-9反义RNA表达质粒pcDNA3.1-MMP-9分别作PCR及双酶切(BamH和Hind)鉴定,证实其中有目的片段完整插入,插入片段测序结果与反义MMP-9序列设计完全一致。结论成功构建了MMP-9反义RNA真核表达载体...

• 单位
  郑州大学第一附属医院