流苏树根尖染色体制片技术优化及核型分析

作者:刘佳庚; 李际红*; 郭海丽; 耿煜然; 王如月; 侯丽丽
来源:分子植物育种, 2020, 18(24): 8223-8232.
DOI:10.13271/j.mpb.018.008223

摘要

本研究以流苏树(Chionanthus retusus)种子的初生根尖为材料,从取材时间、预处理试剂、预处理时间以及解离方法等条件对常规染色体压片技术进行改进与优化,以获得流苏树核型分析的清晰制片。结果表明,取材时间为9:30~10:00 am时根尖中期细胞最多,约占20%~25%;对二氯苯、0.002 mol/L 8-羟基喹啉溶液、对二氯苯与8-羟基喹啉混合液以及冰水混合物四种不同预处理试剂均可获得形态清晰、分散良好的适用于核型分析的清晰制片,其中对二氯苯的最适预处理时间为1 h,0.002 mol/L 8-羟基喹啉和对二氯苯与8-羟基喹啉混合液的最适预处理时间均为6 h,冰水混合物的最适预处理时间为6 h;解离的最适方法为:先用0.075 mol/L KCl溶液前低渗20 min,接着蒸馏水冲洗后放入1 mol/L HCl溶液中60℃处理10 min。流苏树染色体核型公式为2n=2x=46=40m+6sm,流苏树染色体为2B型,核型不对称系数As·K%为57.18%,染色体相对长度组成为2n=7L+14M2+19M1+6S。

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