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摘要
目的 制备一种调控释放干细胞外囊泡的微粒子递送系统，仅干预1次后长期发挥增强肝细胞增殖能力的作用。方法 采用差速离心法提取干细胞外囊泡并鉴定，透射电镜观察外囊泡结构和免疫印记检测外囊泡膜标志蛋白，评价所提取外囊泡符合规范。采用乳液-溶剂挥发法制备“壳-核”结构聚左旋乳酸（poly-L-lactic acid, PLA）微球，在微球“核”结构位置负载干细胞外囊泡（extracellular vesicles, EVs）得到EVs-PLA微球。通过扫描、透射电镜检测微球及外囊泡形貌，粒径分析，缓释实验检测EVs-PLA微球缓释周期，扫描电镜检测缓释至8周EVs-PLA微球形貌变化；将EVs-PLA微球与肝实质细胞共培养，鬼笔环肽/DAPI染色评价EVs-PLA微球生物相容性和细胞毒性，CCK8评价EVsPLA微球对细胞增殖活力的影响作用，免疫印记检测EVs-PLA微球共培养后细胞中增殖标志蛋白表达量并统计数据结果。结果 对比EVs-PLA干细胞外囊泡微球处理组和对照组的肝实质细胞增殖能力评价，发现EVs-PLA微球未造成细胞凋亡和细胞结构发生变异，具有生物相容性无细胞毒性；EVs-PLA微球的“壳-核”结构调控所负载的干细胞外囊泡的释放速率和释放周期，EVs-PLA微球可缓慢释放EVs，单次干预后持续发挥促进肝实质细胞增殖的生物作用。结论 EVs-PLA微球可缓慢释放EVs，单次干预后持续发挥增强肝细胞增殖能力的作用，为探索外囊泡促肝细胞增殖的微递送系统提供了新的思路。
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