摘要
目的研究4型戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)开放阅读框架2(open reading frame 2,ORF2)编码的多肽二聚体特性和抗原性特征。方法从患者血清克隆HEV ORF2基因,在大肠杆菌中表达不同长度的ORF2多肽,并表达点突变多肽,纯化后在SDS-PAGE不同条件下分析二聚体特性,同时用Western blot分析其抗原性特征。结果由459~607位氨基酸构成的ORF2多肽能形成二聚体,而在氨基端截短13个氨基酸或在羧基端截短13个氨基酸均不形成二聚体,562位天冬酰胺、595位异亮氨酸分别突变后在SDS作用下仅以单体存在。Western blot显示,抗-HEV仅与二聚体的ORF2多肽反应,而不与单体ORF2多肽或截短肽反应。结论4型HEV ORF2多肽形成二聚体必须含有459~607位氨基酸,其中562位和595位氨基酸突变能影响二聚体的稳定性。该多肽的抗原性取决于二聚体结构。
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