MicroRNA-9通过SIRT1/NF-κB通路促进TNF-α诱导心肌细胞损伤的机制研究

作者：张朝华; 刘旭帮; 朱银川; 汤建民^*

来源：中国循证心血管医学杂志, 2021, 13(07): 803-806.

• microRNA-9
• 心肌细胞
• 细胞活性
• 肿瘤坏死因子α

目的研究microRNA-9(miR-9)表达对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导心肌细胞(H9c2)损伤的影响,并探讨其分子机制。方法使用CCK8试剂盒检测不同浓度(0、5、10、15和20μg/mL)TNF-α刺激H9c2或TNF-α作用于H9c2不同时间(0、12、24、48和72 h)后心肌细胞活性;向H9c2细胞中转染miR-9抑制剂(miR-9-inhibitor)以敲低miR-9的表达,通过实时荧光定量PCR法检测miR-9的表达,通过免疫印迹法检测SIRT1、p65及p-p65蛋白表达;荧光素酶基因报告系统用于检测miR-9与SIRT1靶向结合情况。结果 TNF-α以剂量和时间依赖性降低心肌细胞活性和促进miR-9在心肌细胞中的表达。与miR-9未敲低组相比,TNF-α刺激后,miR-9敲低组H9c2细胞活性更高(P<0.05)。荧光素酶基因报告结果显示:miR-9靶向抑制SIRT1的表达,miR-9敲低可显著促进H9c2细胞中SIRT1蛋白的表达,显著降低p-p65/p65的比例(P均<0.05)。结论 miR-9通过抑制SIRT1促进NF-κB通路激活。敲低miR-9可抑制NF-κB通路激活从而减轻TNF-α诱导的心肌细胞损伤,提高心肌细胞活性。

• 单位
  郑州人民医院; 郑州大学第二附属医院