摘要
转基因抗病番木瓜已经获得了全球多个国家的商业化应用和进口批准。为了解决转基因番木瓜检测工作中存在阳性对照不易获取的问题,本研究通过基因数据库(美国国家生物信息中心, NCBI),筛选番木瓜内标准基因Papain和Chymopapain基因、以及已经报道的番木瓜转化体‘华农1号’、‘55-1’和‘GM YK’的特异性序列,构建了转基因番木瓜阳性质粒分子,并对其特异性、灵敏度以及适用性进行了验证分析,结果表明:该阳性质粒分子包含的5个外源片段的扩增产物条带清晰、特异性好,检测灵敏度高,可以稳定的检测出100个拷贝的质粒分子;同时对质粒分子的适用性进行了测试,结果显示,构建的质粒分子可以应用于番木瓜组织和加工品的转基因检测中。由此表明本研究构建的转基因番木瓜阳性质粒分子可以作为阳性对照应用于转基因番木瓜的特异性检测。
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