重组Gallinacin-3的克隆及在大肠杆菌中的表达

作者：赵建增; 乔彦良; 李朝阳

来源：中国兽药杂志, 2006, (02): 1-4+34.

• 鸡
• β-防御素
• 大肠杆菌
• 融合蛋白
• 抑菌作用 chicken β-defensin
• Escherichia coli
• recombinant
• antimicrobial activity

防御素是昆虫、植物和动物体内抗感染及激发特异性抗感染免疫的重要抗菌肽。Gallinacin-3(gal-3)可能是鸡体内最重要的β-防御素,但它的功能还未得到研究证实。本试验从鸡黏膜表皮组织中克隆了gal-3编码基因,并在大肠杆菌中成功表达了gal-3与谷胱甘肽转硫酶(GST)融合蛋白。经IPTG诱导后,融合蛋白的产量占细菌总蛋白的33.6%左右,主要以包涵体形式存在。用亲合层析技术从大肠杆菌裂解液中纯化出可溶性重组蛋白,并用酶切除目标蛋白的融合伴侣。抑菌试验发现,重组gal-3-GST融合蛋白在未去除融合伴侣时,就与游离的gal-3有着相同的抑菌活性,对沙门氏肠炎杆菌和志贺氏痢疾杆菌的最小杀...