摘要
背景与目的:建立抑制DNA_PKcs表达的细胞模型,以此探讨DNA_PKcs的功能。材料与方法:构建DNA_PKcs的siRNA抑制表达载体,利用Lipofectamine介导,转染HeLa细胞,筛选稳定表达的转化克隆。Westernblot检测DNA_PKcs表达。通过细胞生长速度检测细胞辐射敏感性变化。结果:设计了作用于DNA_PKcs不同位点的3条siRNA,并构建表达质粒,转染HeLa细胞,获得了3个稳定转化克隆,Westernblot分析表明其DNA_PKcs表达受到明显抑制,细胞对γ射线和紫外线的敏感性增加,接种裸鼠后的肿瘤生长速度减慢。结论:成功建立了DNA_PKcs表达抑制细胞模型,并且发现DNA_PKcs表达抑制后除影响细胞的辐射敏感性外,还可能与肿瘤细胞增殖有关。
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单位军事医学科学院; 放射医学研究所