人α-防御素5前体蛋白在毕赤酵母中分泌表达的研究

作者：汪芳; 吴晖; 李健兴; 余以刚; 李晓凤; 袁琨; 王少沛; 唐语谦

来源：现代食品科技, 2010, (11): 1181-1184+1216.

DOI：10.13982/j.mfst.1673-9078.2010.11.002

• 人α-防御素5前体蛋白
• 分泌表达
• 生物活性 human alpha-defensin-5 preproprotein
• secreted expression
• antimicrobial

为了探索人α-防御素5(HD5)前体蛋白基因在酵母中高效分泌表达的可行性,将其对应基因克隆到载体pPIC9K,得到重组载体pPIC9K-preproHD5,经SacI线性化后,转入Pichiapastoris GS115,得到重组毕赤酵母菌GS115/pPIC9K-preproHD5。应用PCR技术筛选高拷贝转化株,用BMGY培养GS115/pPIC9K-HD5至OD600为2～6时,用BMMY诱导培养120h,离心取上清液,用Tricien-SDS-PAGE和蛋白定量试剂盒分析人α-防御素5前体蛋白的表达量。琼脂扩散法检测人α-防御素5前体蛋白的抑菌活性,发现其对金黄色葡萄球菌(ATCC65...

• 单位
  华南理工大学; 广州清绿健康科技发展有限公司