温阳通脉方通过NRF2/HO-1通路对缺氧/复氧损伤 H9c2心肌细胞氧化应激的保护作用

作者：马艺华; 石月萍^*

来源：中药药理与临床, 2022, 38(05): 73-77.

DOI：10.13412/j.cnki.zyyl.2022.05.015

• 温阳通脉方
• 缺氧/复氧
• 氧化应激
• 核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1

目的:基于核因子NF-E2相关因子2(NRF2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路探讨温阳通脉方含药血清保护H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)后氧化应激损伤机制。方法:制备大鼠的空白血清和温阳通脉方的含药血清，以H9c2心肌细胞为研究对象，用氯化钴(CoCl2)及新鲜培养基制备缺氧/复氧(H/R)模型。将细胞分为：空白对照组、模型对照组、13 g/kg温阳通脉方含药血清5%、10%、20%组。用CCK-8法检测细胞活性；比色法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)的活力或含量；DCFH-DA探针法检测细胞活性氧(ROS)的水平；Western blot法检测低氧诱导因子(HIF-1α)、核因子E2相关因子2(NRF2)、血红素加氧酶1(HO-1)的蛋白表达；Hoechst33342荧光染色法检测细胞凋亡率和形态学变化。结果:与空白对照组比较，模型对照组细胞活性明显降低，MDA、LDH含量、ROS水平明显增高，SOD活力明显降低(P<0.05);HIF-1α、NRF2、HO-1蛋白表达明显上调；核碎裂细胞增加，凋亡率明显增加(P<0.05);与模型对照组比较，温阳通脉方含药血清5%、10%、20%组均能明显改善缺氧/复氧损伤H9c2细胞活性，减少MDA、LDH含量(P<0.05),增加SOD活力(P<0.05),减少ROS含量，下调HIF-1α蛋白表达(P<0.05);不规则形态、核碎裂细胞和凋亡率减少(P<0.05);温阳通脉方20%含药血清组ROS水平、NRF2、HO-1蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论:温阳通脉方能减轻缺氧/复氧诱导的H9c2细胞氧化应激损伤，分子机制可能与调节NRF2/HO-1通路有关。

• 单位
  锦州医科大学