抗人整合素αvβ3-组织因子融合蛋白基因的构建和表达

作者：刘大斌; 张昕; 安小平; 张宝中; 王盛; 周育森; 童贻刚

来源：生物技术通讯, 2010, (04): 488-493.

• 整合素αvβ3
• 单链抗体
• 组织因子
• 融合蛋白 integrin αvβ3
• single chain Fv
• tissue factor
• fusion protein

目的:利用基因工程技术构建和表达抗人整合素αvβ3单链抗体(scFv)与人可溶性组织因子(sTF)的融合蛋白scFv-sTF。方法:用重叠延伸PCR技术扩增scFv基因,同时用组装PCR方法人工合成sTF基因,然后以酶切连接方式融合2个基因,并克隆至原核表达载体pQE80L中,构建表达质粒pQE80L-scFv-sTF,以重组子转化大肠杆菌M15诱导目的基因表达。结果:SDS-PAGE分析显示工程菌可以表达相对分子质量约55×103的融合蛋白scFv-sTF,Western印迹分析证实表达的目的蛋白具有6×His标签;经低剂量IPTG诱导和较低温度培养,scFv-sTF获得了可溶性表达;纯化回...

• 单位
  军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室