人肌细胞增强因子2C基因慢病毒载体的构建及其在293T细胞中的表达

作者：孙兆刚; 付鹏; 刘爱华; 王静波; 孙新六; 刘兴田

来源：中华临床医师杂志(电子版), 2012, (20): 6306-6309.

• 慢病毒属
• 绿色荧光蛋白质类
• MEF2C
• 293T细胞 Lentivirus
• Green fluorescent proteins
• MEF2C
• 293T cell line

目的构建人肌细胞增强因子2C(MEF2C)慢病毒表达载体并检测其表达性能,以便应用过表达技术进一步研究MEF2C的功能。方法以人MEF2C基因序列为模板合成其编码框序列,通过限制性内切酶NotⅠ和NsiⅠ酶切、T4DNA连接酶连接,将MEF2C插入慢病毒载体质粒LV5-GFP,构建人MEF2C基因重组慢病毒质粒载体,转化感受态细菌,筛选阳性克隆,与包装质粒通过脂质体共转染人胚肾细胞系293T,进行慢病毒包装并测定病毒滴度。病毒感染293T细胞,荧光显微镜下观察感染效率,PCR方法检测MEF2C mRNA的过表达情况。结果成功构建慢病毒表达载体LV5-MEF2C-GFP,三质粒共转染293T细胞...

• 单位
  泰安市中心医院