牛卵泡颗粒细胞PRSS35表达模式及功能研究

作者：毕锡麟; 王锴; 李鹏飞; 景炅婕; 韩琦; 吕丽华^*

来源：畜牧兽医学报, 2018, 49(11): 2394-2401.

• 牛
• 卵泡
• 颗粒细胞
• PRSS35

旨在探究丝氨酸蛋白酶35(serine protease 35,PRSS35)在牛卵泡颗粒细胞(granulosa cells,GCs)中的表达及功能。采用B超超声波检测确定牛优势卵泡(dominant follicle,DF)与从属卵泡(subordinate follicles,SF),分离优势卵泡与从属卵泡颗粒细胞;利用qRT-PCR和Western blotting技术检测PRSS35在DF与SF的表达情况;免疫组化技术对PRSS35进行定位研究;设计PRSS35siRNA基因沉默序列,经脂质体转染GCs,测定培养液雌激素(estrogen,E2)浓度和GCs凋亡情况,研究PRSS35对牛卵泡颗粒细胞生长发育的影响。结果表明:1)PRSS35mRNA在DF中的表达量极显著高于SF(P<0.001);2)PRSS35在牛DF和SF颗粒层与膜层均有表达;3)PRSS35在DF中的表达量极显著高于SF(P<0.01);4)PRSS35基因沉默后,GCs凋亡细胞百分率极显著增高(P<0.001),培养液雌激素浓度极显著降低(P<0.01)。综上表明,PRSS35在牛卵泡颗粒层和膜层均有表达,且在DF表达量极显著高于SF;PRSS35基因沉默后,通过抑制GCs增殖,降低E2分泌浓度,从而抑制牛卵泡的生长发育。该研究为深入探讨PRSS35与牛卵泡发育的关系奠定基础。

• 单位
  生命科学学院; 山西农业大学; 动物科技学院