缝隙连接阻断剂1-庚醇对小鼠骨髓基质干细胞体软骨分化的影响

作者：张宇坤; 杨述华; 杨操; 孙立; 田洪涛

来源：中国矫形外科杂志, 2007, 15(05): 380-383.

DOI：10.3969/j.issn.1005-8478.2007.05.019

• GDF-5
• 软骨
• 缝隙连接
• 小鼠
• 骨髓基质干细胞

[目的]研究缝隙连接阻断剂1-庚醇对小鼠骨髓基质干细胞体外软骨分化的影响。[方法]体外培养小鼠骨髓基质干细胞(MSCs),贴壁细胞传代,取第3代细胞,以生长分化因子-5(GDF-5)(100ng/ml)和1-庚醇(2.5μmol/L)干预培养后,MTT法测定1-庚醇对小鼠骨髓基质干细胞增殖的影响,RT-PCR和免疫细胞化学法检测Ⅱ型胶原的表达,Westernblotting检测Cx43蛋白的表达,阿尔辛蓝(Alcian)染色蛋白多糖。[结果]MTT结果显示2.5μmol/L浓度1-庚醇对小鼠MSCs的增殖不产生影响,对细胞没有毒性抑制作用;RT-PCR和免疫细胞化学显示1-庚醇能够抑制Ⅱ型胶原mRNA和蛋白的表达;Alcian染色结果显示1-庚醇抑制分化细胞分泌蛋白多糖基质;Western blotting结果表明1-庚醇对Cx43蛋白的表达没有作用。[结论]GDF-5能够定向诱导小鼠骨髓基质干细胞向软骨方向分化,Cx43蛋白介导的缝隙连接细胞间通讯在GDF-5诱导软骨分化中发挥着很重要的作用。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院