猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型和猪流感病毒四重PCR检测方法的建立

作者：张宇鑫; 吴艳; 张伟; 田永宽; 黄云; 曾智勇; 吴学祥^*; 王彬^*

来源：动物医学进展, 2023, 44(08): 22-27.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2023.08.026

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 伪狂犬病病毒
• 猪圆环病毒2型
• 猪流感病毒
• 四重PCR

为了快速、准确检测4种猪呼吸道病毒，根据NCBI GenBank数据库中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪流感病毒(SIV)的基因序列，设计4对特异性引物，建立一种能通过扩增片段大小来同时鉴别检测PRRSV(111 bp)、PRV(173 bp)、PCV2(273 bp)、SIV(445 bp)的四重PCR检测方法。特异性试验结果显示，扩增PRRSV、PRV、PCV2、SIV模板均能得到预期特异条带，而扩增灭菌水(阴性对照)、CSFV、JEV不产生任何条带。敏感性试验结果显示，该方法最低病毒核酸检出量分别为PRRSV(6.5×104copies/μL)、SIV(2.68×105copies/μL)、PCV2(7.16×105copies/μL)、PRV(2.37×104copies/μL)。用所建立的四重和各单一PCR方法检测45份临床样品，四重PCR的阳性检出率分别为PCV2 22.2%(10/45)、PRRSV 17.7%(8/45)、PRV 4.4%(2/45)、PRRSV+PCV2 13.3%(6/45),四重PCR方法与单一PCR方法的阳性符合率为100%。表明建立的病毒四重PCR检测方法特异性强、敏感性高，可用于上述4种呼吸道病毒的鉴别检测。

• 单位
  动物科学学院; 贵州大学