等度洗脱HPLC分析冻存与新鲜心肌线粒体心磷脂含量的比较

作者：魏稼黎; 段忠心; 喻田; 李李; 刘镭

来源：贵州医药, 2015, 39(12): 1065-1067.

• 心磷脂
• 高效液相色谱
• 等度洗脱
• 线粒体

目的建立稳定、快速检测心磷脂(cardiolipin,CL)的等度洗脱(HPLC)检测法,并检测线粒体冻存前后CL含量变化。方法雄性SD大鼠心脏30个,分成C、I、IR 3组,每组10个。C组于Langendorff装置灌注80min;I组灌注20min后,缺血30min;IR组灌注20min,缺血30min,再灌注30min。提取其线粒体,均分成2份,1份即可提取总磷脂,1份冻存3个月后提取总磷脂。采用等度洗脱正相HPLC分析心磷脂。结果 CL保留时间为为9.697min,最小检测限为0.156 25μg(S/N≥3),线性范围0.3140μg,回归方程为CL(μg)=0.003 582×峰面积-0.728 0(r=0.988)。线粒体CL含量缺血后显著减少,但再灌注未进一步加重CL丢失。冻存线粒体CL含量无明显变化。结论正相等度洗脱分析大鼠心肌线粒体CL快速、有效,线粒体冻存不影响CL检测。

• 单位
  遵义医学院附属医院; 中南大学湘雅二医院; 南华大学附属第二医院