连翘提取物通过PI3K-AKT-mTOR信号通路逆转结肠癌氟尿嘧啶耐药细胞株的研究

作者：俞燕丽; 傅睿^*

来源：新中医, 2019, 51(05): 27-30.

DOI：10.13457/j.cnki.jncm.2019.05.007

• 结肠癌
• 连翘提取物
• 氟尿嘧啶(5-FU)
• PI3K-AKT-mTOR
• 细胞实验

目的:通过体外实验观察中药连翘提取物对结肠癌氟尿嘧啶(5-FU)耐药细胞株的作用及机制。方法:构建结肠癌5-FU耐药细胞株SW480R,并运用MTT、流式细胞术、Western Blot检测不同浓度连翘提取物对SW480R的抑制增殖、诱导凋亡以及蛋白磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylinositide 3-kinases,PI3K)、磷酸化蛋白激酶B (Phosphorylated-protein kinase B,PAKT)、蛋白激酶B (Protein kinase B,AKT)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(Phosphorylated-mammalian target of rapamycin,P-mTOR)、雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)、磷酸化真核翻译起始因子4E结合蛋白1 (Phosphorylated-eukaryotic translation initiation factor 4E-binding protein 1,P-4EBP1)、真核翻译起始因子4E结合蛋白1 (Eukaryotic translation initiation factor4E-binding protein 1,4EBP1)的表达。结果:经过5-FU长期诱导,构建培养而得到结肠癌5-FU耐药细胞株SW480R的半抑制浓度(The half maximal inhibitory concentration,IC50)为62.68μmol/L,而正常结肠癌细胞SW480的IC50为13.54μmol/L。与对照组比较,不同浓度连翘提取物对SW480R有抑制增殖作用(P <0.05),且呈剂量依赖性,其IC50剂量为13.63μmol/L。与对照组比较,不同浓度连翘提取物能使活化型半胱天冬酶3 (Cleaved-Caspase 3)、活化型半胱天冬酶9 (Cleaved-Caspase 9)的表达增加,原型Caspase 3、Caspase 9的表达下降,同时显著下调信号通路蛋白PI3K、P-AKT、P-mTOR、P-4EBP1的表达(P <0.05)。结论:连翘提取物能从体外明显抑制结肠癌5-FU耐药细胞株SW480R的生长,诱导凋亡,其作用机制可能通过抑制PI3K-AKTmTOR信号通路,最终起到抑制肿瘤生长的作用。

• 单位
  杭州市余杭区中医院; 浙江中医药大学; 浙江省立同德医院; 浙江省中医药研究院