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摘要
为了明确猪TREX1在JEV感染中的作用，本研究利用PCR扩增获得猪TREX1基因的ORF，并将该基因克隆至真核表达载体p3xFlag-CMV-14中，将构建的重组真核表达质粒命名为pFlag-pTREX1，利用lipofectamine 2000将构建成功的pFlag-pTREX1重组质粒瞬时转染至293T细胞中，通过Western blot检测其表达情况，最后在PIEC细胞上，通过猪TREX1基因过表达或沉默TREX1基因的表达，分析其在JEV感染中的作用。结果显示：本研究成功构建了Flag-pTREX1真核表达载体；利用抗Flag抗体可以识别真核表达的Flag-pTREX1融合蛋白，约35 kDa；与转染Flag-vector的样品相比，过表达猪TREX1促进JEV在PIEC上的感染；与NC对照组相比，沉默猪TREX1基因的表达抑制JEV在PIEC上的表达。结果表明，本研究成功构建了猪TREX1基因真核表达载体并初步探索了猪TREX1在JEV感染中的作用，这为进一步研究猪TREX1在猪源病毒中的作用奠定了基础。
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