漆酶Lcc9在灰盖鬼伞菌中的同源过表达

作者：张晶娜; 周刚; 刘娟娟; 方**; 肖亚中

来源：生物学杂志, 2021, 1-6.

• 漆酶
• Lcc9
• 灰盖鬼伞
• 同源过表达
• 高密度发酵

为了高效制备漆酶Lcc9,克隆了Lcc9编码基因,利用酿酒酵母同源重组技术构建lcc9过表达载体并在Corprinopsis cinerea Okayama 7#130（OK7）和FA2222中进行同源过表达。经原生质体共转化、再生培养基初筛、最简培养基复筛,分别获得46株OK7和29株FA2222阳性转化子。摇瓶发酵结果显示,在Kjalke培养基中接种5%（体积分数）,经37 oC培养6～7 d后,OK7阳性菌株漆酶活力达到5.1～21.1 U/m L,FA2222阳性菌株漆酶活力达到3.7～12.3 U/m L,分别为野生型表达量的19.2和241.2倍。在3 L发酵罐中对FA2222阳性菌株进行漆酶的发酵制备,结果显示,经37 oC、50 r/min培养108 h后菌株漆酶活力达59 U/m L,相比普通摇瓶发酵,漆酶活力进一步提高了4.8倍。

• 单位
  生命科学学院; 安徽大学