参附注射液调控巨噬细胞自噬对脓毒症小鼠免疫功能影响

作者：赵锋利; 罗苑苑; 赵馥; 张先进; 林新锋; 冼绍祥^*

来源：辽宁中医药大学学报, 2019, 21(08): 34-37.

DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2019.08.008

• 脓毒症
• 参附注射液
• 巨噬细胞自噬
• 免疫调节

目的:观察参附注射液对脓毒症小鼠免疫功能的影响,探讨相关机制。方法:将90只10周龄雄性SDF级C57BL6小鼠使用随机数字表法分为对照组(Control,n=30)、脓毒症组(CLP,n=30)、参附注射液治疗组(SF,n=30)。脓毒症小鼠模型制备采用国际公认的盲肠结扎穿孔法。SF组造模后第1天开始腹腔注射参附注射液(4 mL·kg-1·d-1,共3 d);Control组和CLP组注射生理盐水(4 mL·kg-1·d-1,共3 d)。比较各组小鼠造模死亡率,通过ELISA检测炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和抗炎因子IL-10水平;使用流式细胞法检测外周血CD3+CD4+和CD3+CD8+比值;免疫印记检测巨噬细胞P62、LC3 II/I以及cleaved caspase-3的表达水平;电镜检测评价巨噬细胞线粒体损伤情况。结果:Control组无小鼠死亡,CLP组小鼠死亡率为70.0%,而SF组小鼠死亡率明显下降为30.9%(P<0.05)。Control组小鼠外周血CD3+CD4+/CD3+CD8+为2.12,CLP组明显下降为1.13(P<0.05);SF组小鼠明显升高为1.56(P<0.05)。CLP组小鼠血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平较Control组均明显升高(P<0.05),抗炎因子IL-10水平显著下降(P<0.05),而经过参附注射液治疗后上述炎症因子下降(P<0.05),抗炎因子升高(P<0.05)。免疫印迹结果提示CLP组的小鼠脾巨噬细胞中的自噬蛋白P62和LC3 II/I表达水平均低于control组,凋亡蛋白cleaved caspase-3明显升高;与CLP组比较,SF组P62和LC3 II/I表达增高,cleaved caspase-3降低(P<0.05)。电镜证实CLP组小鼠脾脏巨噬细胞线粒体损伤较为严重,SF组明显减轻。结论:参附注射液能够明显调节免疫抑制脓毒症小鼠的免疫系统,抑制炎症反应与调节小鼠脾巨噬细胞自噬相关。

• 单位
  广州中医药大学第一附属医院