摘要
从农药污染土壤中分离出的一株真菌具有广谱降解有机磷农药的能力。菌体培养物经硫酸铵分级沉淀、SephadexG_100凝胶过滤、DEAE_SephroseCL6B柱层析纯化广谱有机磷农药水解酶。研究结果表明该酶为胞内酶,主要定位在细胞膜上。酶的最适反应温度为45℃,最适pH7 5,在50℃以下以及在pH6~9 5范围内活性稳定。Hg2+、Fe3+、对氯高汞苯甲酸、碘乙酸和N_乙基马来酰亚胺对该酶有强烈的抑制作用,而Cu2+、巯基乙醇、二硫苏糖醇、二硫赤藓糖醇、谷光甘肽和去污剂对酶有不同程度的激活作用。该酶不仅可以作用于含PO键的有机磷农药;而且也能水解含PS键的有机磷农药。以甲基对硫磷和内吸磷为底物的Km值分别为63μmol L,256μmol L;Vmax分别为306μmol·min-1,189μmol·min-1;Kcat分别为1102s-1,610s-1。
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单位生物防治国家重点实验室; 中山大学生命科学学院