摘要
为了进一步验证转化生长因子(TGF-β)/Smads信号通路在脯氨酸(Pro)促进鱼鳔胶原蛋白沉积中的作用,研究利用TGF-β/Smads通路抑制剂干扰,分析干扰前后鱼鳔中胶原蛋白含量及相关基因转录水平的变化。根据前期实验获得的Pro最佳添加量,制定饲料配方,饲喂浅色黄姑鱼1月后,通过腹腔注射氧化苦参碱(Oxymatrine)为期1个月。在实验结束后,测量各项指标,评估干扰前后, Pro促进鱼鳔胶原蛋白沉积的效果及变化。实验结果表明:Pro能显著上调TGF-β/Smads通路中相关基因的表达,并促进鱼鳔胶原蛋白沉积,Oxymatrine干扰显著下调了TGF-β/Smads通路中相关基因(Col1α1、Col1α2、TGF-β和Smad2)表达,同时导致鱼鳔中胶原蛋白沉积下降。由此推断Pro通过激活TGF-β/Smads通路促进鱼鳔中胶原蛋白沉积,而Oxymatrine干扰抑制了TGF-β/Smads通路,导致Smad2与Col1α2启动子结合受阻,进而下调了Col1α2基因的转录,从而降低鱼鳔中胶原蛋白的沉积。综上表明, TGF-β/Smads信号通路在Pro促进浅色黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白沉积过程中起着重要调控作用,其中Col1α1、Col1α2、TGF-β和Smad2扮演着重要角色,研究结果可为鱼类胶原蛋白代谢的营养调控提供新思路和新方法。
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