基于微流控等温扩增技术的甲型H1N1流感病毒快速检测

作者：孔文; 王瑞丽; 赵荣涛; 孙明璇; 郭旭东; 杨益; 刘婉莹; 郝荣章; 宋宏彬

来源：广西医科大学学报, 2018, 35(04): 560-563.

DOI：10.16190/j.cnki.45-1211/r.2018.04.034

• 微流控
• RT-LAMP
• 流感病毒
• H1N1
• 现场检测

目的:以甲型H1N1流感病毒检测为例,建立一种简便、快速的流感病毒检测方法,为呼吸道传染病疫情防控提供技术支持。方法:整合环介导等温扩增技术(LAMP)和微流控芯片技术,建立微流控实时荧光逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)快速检测方法;针对甲型H1N1流感病毒的M基因序列中8个不同区段设计LAMP引物,根据扩增效果筛选出1套(6条)引物,并进行临床样本检测验证。结果:所建立的检测方法可实现扩增结果的荧光实时判读,能在恒定温度(65℃)30 min内完成扩增反应,检测限可达10copies/μL,仅对甲型H1N1流感病毒产生扩增曲线,对甲型H3、H5、H7、H9及乙型流感病毒均无扩增;对70份临床样本的检测结果与荧光定量PCR方法一致,特异性和灵敏度均为100%;该方法具有体系封闭、污染小、试剂用量小的优势。结论:所建立的微流控实时荧光RT-LAMP是一种快速、灵敏、特异、简便的检测甲型H1N1流感病毒的方法,便于开展现场检测。

• 单位
  广西医科大学; 中国人民解放军疾病预防控制所