科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
本研究旨在探究腐殖酸钠（HNa）对肠产毒素性大肠杆菌K88(ETEC K88)感染小鼠肠道损伤的保护作用。选取健康的无特定病原体（SPF）级雌性昆明小鼠30只，随机分为3组，对照组、模型组（ETEC组）、HNa干预组（ETEC+HNa组），每组10只。对照组和ETEC组小鼠每天灌胃0.2 mL生理盐水，ETEC+HNa组小鼠每天灌胃0.2 mL 5%HNa；试验第8天，ETEC和ETEC+HNa组小鼠灌胃0.2 mL 5×1010CFU/mL ETEC K88。试验期10 d。采用苏木精-伊红（HE）染色法观察空肠病理变化，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清炎症因子含量，采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测肠道屏障相关蛋白的mRNA表达，采用蛋白免疫印迹（Western blot）法检测空肠紧密连接、黏附连接、肠道组织炎性小体和细胞凋亡相关蛋白的表达。结果表明：1）与对照组和ETEC+HNa组，ETEC组小鼠体重及空肠绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度显著降低（P<0.05）。2）与对照组和ETEC+HNa组相比，ETEC组小鼠血液白细胞、单核细胞、粒细胞数量及血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸（D-Lac）含量显著升高（P<0.05），血清白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)含量显著降低（P<0.05）。3）与对照组和ETEC+HNa组相比，ETEC组空肠闭合蛋白（Occludin）、封闭蛋白-1(Claudin-1)、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）和黏蛋白-2(MUC-2)的mRNA相对表达量显著降低（P<0.05），空肠Claudin-1、ZO-1、E-cadherin和MUC-2的蛋白表达量也显著降低（P<0.05）。4）与对照组和ETEC+HNa组相比，ETEC组空肠核因子-κB(NF-κB)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱天冬蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（Bax）的蛋白表达量显著升高（P<0.05），空肠B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的蛋白表达量显著降低（P<0.05）。5）与对照组相比，ETEC组粪便大肠杆菌数量显著增加（P<0.05），粪便乳酸菌数量则显著降低（P<0.05）。与ETEC组相比，ETEC+HNa组粪便大肠杆菌显著降低（P<0.05）。由此可见，HNa可以通过抑制肠道组织炎性小体激活、肠道上皮细胞凋亡以及上调肠道屏障相关蛋白的表达缓解ETEC K88感染引起的肠道损伤。
- 单位
