痢疾志贺菌侵袭素IpaC的原核表达及纯化复性

作者：姚晓坤; 伦永志; 成军; 刘顺爱; 韩铭; 孙杰

来源：中国微生态学杂志, 2017, 29(04): 373-376.

DOI：10.13381/j.cnki.cjm.201704001

• 侵袭素
• IpaC
• 原核表达
• 蛋白纯化

目的为进一步研究痢疾志贺菌侵袭素IpaC蛋白的侵袭活性,必须先获得IpaC重组融合蛋白。方法将IpaC基因亚克隆至表达载体pET-24α(+)中,转化至E.coli BL21(DE3)表达宿主菌中,采用IPTG优化诱导表达,然后纯化复性重组蛋白。结果重组蛋白最佳表达条件为0.50mmol/L IPTG、30℃诱导6h,获得分子量约为33kDa的IpaC重组蛋白。Western blotting证实了重组蛋白的特异性。IpaC重组蛋白主要以包涵体形式在宿主菌中表达,通过纯化后得到单一的目的蛋白。结论成功构建IpaC原核表达体系,并获得了蛋白的高效表达及优化。初步建立了IpaC重组蛋白的纯化方案。为进一步研究IpaC的侵袭性作用奠定了基础。

• 单位
  莆田学院; 首都医科大学附属北京地坛医院; 浙江医药高等专科学校