猪源H9N2亚型流感病毒感染A549细胞的增殖研究

作者：李珮瑶; 高晶萍; 梁亭; 罗强; 李军; **举; 徐彤^*; 张瑞华^*

来源：中国动物传染病学报, 2020, 28(06): 54-59.

• H9N2亚型
• 猪源流感
• A549细胞
• 增殖

为了确定猪源H9N2亚型流感病毒(SIV)在人肺腺癌上皮细胞(A549)中增殖的最佳条件,将A549细胞培养至单层后,通过不同浓度TPCK-胰酶维持液(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 μg/mL)、不同浓度的H9N2亚型SIV(10-1～10-7)、不同病毒吸附时间(0 h、1.0 h、1.5 h和2.0 h)及不同pH值的细胞培养液作用细胞条件下,观察A549细胞形态学变化并取样检测细胞上清液中的HA滴度。结果显示:在未加病毒作用时,A549细胞对TPCK-胰酶的最大耐受浓度为1 μg/mL;用含1 μg/mL的TPCK-胰酶的细胞培养液(不含牛血清)将H9N2亚型SIV稀释为不同的浓度感染A549,在0.3 μg/mL的胰酶维持液、病毒稀释倍数为10-2、吸附时间为1 h、细胞培养液pH值为7.5感染条件下,培养时间为60 h和72 h 时HA滴度分别为5.4log2和6.4log2。结果表明,当TPCK-胰酶维持液浓度为0.3 μg/mL、病毒接种浓度为10-2、吸附时间为1 h、细胞培养液pH值为7.5时,H9N2亚型流感病毒在A549细胞中增殖情况最佳,培养72 h并冻融后上清液HA滴度可达到峰值7.2log2。

• 单位
  河北北方学院