摘要

克隆灵芝(Ganoderma lingzhi)基因gl26016,全长为1 169 bp,开放阅读框为1 107 bp,序列分析表明该基因编码Cys2His2(C2H2)型转录因子。采用CRISPR/Cas9方法缺失该基因483 bp序列,通过PCR扩增及测序表明成功获得突变菌株△GL26016。对△GL26016与野生型菌株(WT)的菌丝生长和灵芝酸含量进行检测,结果表明:两者相比,菌丝形态和菌丝体干重差异不显著,△GL26016中灵芝酸含量较高。△GL26016中灵芝酸GA-Mk、GA-S、GA-Me在第6天的含量分别为(5.09±0.36)、(5.36±0.11)、(3.45±0.26)μg·mg-1,分别是WT菌株积累量的1.51、1.47、1.93倍。研究结果表明GL26016参与灵芝酸生物合成调控。

全文