miRNA-296-5p靶向BOX抑制胃癌细胞的凋亡

作者：汤**; 吴俊; 吴章强; 凌英杰; 童骎; 胡丛岗

来源：全科医学临床与教育, 2020, 18(02): 113-116+120+92.

DOI：10.13558/j.cnki.issn1672-3686.2020.002.005

• 胃癌
• miRNA-296-5p
• BOK
• 凋亡

目的分析miRNA-296-5p在癌旁组织和肿瘤组织中的表达差异,并研究miRNA-296-5p抑制胃癌细胞凋亡的机制。方法采用实时荧光定量PCR检测5例胃癌患者胃癌组织和相应的癌旁组织中的miRNA-296-5p的表达水平;应用miRNA-296-5p mimic、miRNA-296-5p inhibitor和阴性对照分别转染BGC-823和MGC-803细胞,通过CCK-8检测细胞的增殖水平,通过流式细胞术检测细胞凋亡水平;采用蛋白印迹技术检测BOK蛋白表达水平;采用双荧光素酶实验验证miRNA-296-5p和BOX之间的关系。结果与癌旁组织相比,miRNA-296-5p在胃癌组织中明显升高(t=-6.37,P<0.05),且与BOK蛋白表达呈负相关。miRNA-296-5p过表达之后,明显抑制MGC-803和BGC-823细胞凋亡;miRNA-296-5p表达下降之后,MGC-803和BGC-823细胞的凋亡水平明显升高。实时荧光定量PCR和Western-blot结果表明miRNA-296-5p过表达之后,BOK蛋白的表达水平明显降低,而miRNA-296-5p被抑制之后,BOK蛋白的表达水平明显升高。双荧光素酶报告实验显示,miRNA-296-5p靶向BOK的miRNA的3'非编码区。结论相较于癌旁组织,miRNA-296-5p在胃癌组织中高表达,通过抑制BOK的蛋白水平实现促进胃癌进展,从而降低胃癌细胞的凋亡水平。