摘要
探讨人参-牡丹皮功效部位含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的影响。实验采用H2O2诱导损伤HUVEC,分为6组[空白组、模型组、人参总皂苷(TGG)组、丹皮总苷(TGM)组、丹皮酚(P)组、TGG+TGM+P组],各组药物与H2O2共培养24 h后,微量酶标法检测细胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)、Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡率及细胞内Ca2+浓度、活性氧(ROS)及线粒体膜电位(JC-1)水平;Western blot法检测线粒体凋亡通路相关蛋白Bax, Bcl-2,cytochrome C,caspase-3,caspase-9的表达情况。结果显示H2O2对HUVEC有明显的损伤作用,使细胞SDH和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性显著降低(P<0.01),细胞凋亡+坏死率、JC-1下降率、ROS升高率和Ca2+浓度升高率显著升高(P<0.01);人参-牡丹皮功效部位含药血清可不同程度地升高细胞内SDH和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性(P<0.05或P<0.01),降低细胞凋亡+坏死率、JC-1下降率、ROS升高率和Ca2+浓度升高率(P<0.05或P<0.01);同时下调线粒体凋亡通路相关蛋白Bax, caspase-3,caspase-9,cytochrome C表达水平,上调Bcl-2蛋白表达水平。结果表明,人参-牡丹皮功效部位含药血清对ROS所致血管内皮细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与改善线粒体功能,抑制线粒体凋亡通路被激活有关。
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单位河南省洛阳正骨医院; 河南中医药大学; 河南省中医药研究院