鉴别蓝舌病病毒血清29型RT-PCR与qRT-PCR方法的建立与应用

作者：李占鸿; 宋子昂; 谷文喜; 李华春; 钟旗; 杨振兴; 李卓然; 廖德芳; 杨恒^*

来源：中国兽医科学, 2022, 52(01): 25-32.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0012

• 蓝舌病病毒
• BTV血清29型
• 血清型鉴定
• qRT-PCR
• RT-PCR

为建立快速鉴别蓝舌病病毒血清29型(BTV-29)的方法,根据BTV-29型毒株基因节段2(Seg-2)的序列特征,分别设计用于RT-PCR与q RT-PCR方法的特异性引物与Taq Man探针,通过试验确定其敏感性,用BTV-1～BTV-24等核酸作为对照评价其特异性。对BTV-29感染动物血液样本中的病毒核酸进行监测,并用BTV群特异q RT-PCR方法验证其可靠性。结果显示,建立的BTV-29特异RT-PCR的灵敏度是1.12×102 copies/μL,而BTV-29特异q RT-PCR的灵敏度是1.12×101 copies/μL,均与BTV-1～BTV-24、流行性出血病病毒、帕利亚姆病毒和阿卡斑病毒之间无交叉反应;用BTV-29特异q RT-PCR检测BTV-29型感染山羊血液中的BTV-29核酸的动态变化,结果与BTV群特异q RT-PCR检测结果基本一致。本研究建立的BTV-29特异RT-PCR和q RT-PCR方法均具有良好的特异性和较高的灵敏度,能快速鉴别BTV-29,为BTV-29的致病性、诊断与流行病学研究提供了技术保障。

• 单位
  云南省畜牧兽医科学院; 云南农业大学; 新疆畜牧科学院兽医研究所; 昆明学院; 生命科学学院