重组谷氨酸脱羧酶的表达条件优化、纯化及酶学性质研究

作者：范恩宇; 黄俊; 胡升; 梅乐和

来源：发酵科技通讯, 2010, 39(3): 5-8.

DOI：10.3969/j.issn.1674-2214.2010.03.003

• 谷氨酸脱羧酶
• 蛋白表达
• 优化
• 亲和纯化
• γ-氨基丁酸

为了利用从γ-氨基丁酸(GABA)高产菌株--短乳杆菌LactobacilJus brevis CGMCC NO.1306中克隆并表达的谷氨酸脱羧酶进行CABA的生物制备,研究了影响重组工程菌E.coli BL21(pET28а(+)-gad)生长的培养基组成和攸关CAD表述水平的诱导条件,优化了这些关键因素,提高了重组GAD的表达水平.采用Ni-NTA亲和纯化方法实现了对所得重组GAD的纯化,获得了纯酶,并确定了重组GAD产生GABA的最适pH值和温度,为该酶的工业应用创造了条件.

• 单位
  浙江大学; 浙江科技学院