牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡中的作用及对Bim、整合素α5的影响

作者：张文娟; 王原明; 曹伟靖; 肖霞

来源：解放军医药杂志, 2016, 28(08): 23-27.

• 牙龈蛋白酶
• 成骨细胞
• 凋亡
• Bcl-2蛋白
• 细胞死亡调节子蛋白
• 整合素ɑ5

目的探讨牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡的作用及对与Bcl-2蛋白相互作用的细胞死亡调节子(Bim)蛋白、整合素ɑ5的影响。方法分离并提取牙龈蛋白酶,测定其活性,实验分为两组,其中实验组采用浓度为1.812 U/L的牙龈蛋白酶处理小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)48 h,对照组采用牙龈蛋白酶特异性抑制剂(TCLK)对牙龈蛋白酶进行预处理,采用TUNEL-DAPI法测定两组MC3T3-E1细胞的凋亡率,采用免疫印迹法测定不同时间两组Bim蛋白、整合素ɑ5表达变化。结果实验组牙龈蛋白酶中精氨酸牙龈蛋白酶(Rgp)、赖氨酸牙龈蛋白酶(Kgp)的活性均显著高于对照组(P<0.01);在0 h,两组MC3T3-E1细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),在第16、24、48 h实验组的MC3T3-E1细胞凋亡率均显著高于对照组(P<0.05);在第8、16、24、48 h实验组的Bim蛋白表达均显著高于本组0 h(P<0.05),在第24 h时达到最高值,同时也显著高于对照组(P<0.05);在第16、24、48 h实验组的整合素ɑ5表达较本组0 h均显著降低(P<0.05);同时显著低于对照组(P<0.05)。结论牙龈蛋白酶能成功诱导成骨细胞凋亡,这一作用机制可能与增强Bim蛋白表达、下调整合素ɑ5表达有关。

• 单位
  延安大学附属医院