进口对虾急性肝胰腺坏死病病原分离鉴定及环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立

作者：黄燕琼; 邓艳; 门星怡; 陈婉霞; 柏建山^*

来源：现代食品科技, 2022, 38(04): 275-281.

DOI：10.13982/j.mfst.1673-9078.2022.4.0593

• 急性肝胰腺坏死病
• 分离鉴定
• 环介导等温扩增(LAMP)

该研究抽取了453批在2017～2018年自越南、泰国、马来西亚进境的对虾样品进行对虾急性肝胰腺坏死病（Acute Hepatopancreatic Necrosis Disease,AHPND）病原的分离鉴定，并对结果进行分析。结果显示：直接取对虾肝胰腺组织进行病原分离检出率只有2.87%，而肝胰腺组织经过富集培养后，检出率则达到16.11%；来自越南进境的对虾样品阳性检出率最高，312批次的样品阳性检出率为21.79%，分离出11株阳性菌株，分离成功率为15.07%。为了快速、灵敏和可靠的鉴定AHPND病原，该研究建立了一种快速检测AHPND病原的环介导等温扩增（LAMP）方法。结果表明：仅AHPND病原具有明显的扩增曲线和颜色变化，质粒的检测低限为1 fg/μL，比普通PCR方法高100倍，且稳定性强；对37个实际样本检测显示，阳性率为35.13%，阳性检出率高于普通PCR检测结果。该研究建立的LAMP快速检测方法适用于AHPND病原特异性检测，病原的分离鉴定分析也可为进口对虾的实验室检测提供参考数据。