HaCaT条件培养基联合全反式维甲酸诱导人脂肪干细胞向表皮细胞分化的初步研究

作者：林文韬; 刘晓雪; 刘勇; 陈俊杰; 岑瑛

来源：华西医学, 2018, 33(03): 325-331.

• 人脂肪干细胞
• 表皮细胞
• 全反式维甲酸
• HaCaT细胞

目的探讨HaCaT条件培养基能否促进全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导人脂肪干细胞向表皮细胞的分化。方法体外分离培养脂肪干细胞,通过流式细胞术检测CD34、CD45、CD73、CD90、CD105蛋白的表达以及成脂成骨诱导分化鉴定脂肪干细胞。Transwell小室构建气液界面培养模型,配制含ATRA、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)的诱导培养基A以及含50%HaCaT上清液、ATRA、EGF、KGF的诱导培养基B。实验分3组,即诱导培养基A组、诱导培养基B组及常规培养未诱导组,气液界面诱导培养12 d,流式细胞术检测诱导后细胞CK14、15、16、19广谱细胞角蛋白(pan cytokeratin,Pan-CK)的表达。免疫荧光法检测CK14的表达。结果脂肪干细胞成表皮诱导培养后,流式细胞术检测结果显示诱导组B Pan-CK表达率大于诱导组A,两组均大于未诱导组[分别为(22.0±3.5)%、(11.9±2.7)%、(1.1±0.3)%,P<0.01],免疫荧光法检测结果显示诱导组均具有CK14荧光表达,诱导组B CK14表达率大于诱导组A[分别为(19.5±7.0)%、(10.8±5.7)%,P<0.01],未诱导组未见CK14荧光表达。结论 HaCaT条件培养基可加强ATRA诱导人脂肪干细胞向表皮细胞的分化的能力。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院; 四川大学华西医院