靶向人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)整合酶多肽药物表达载体的构建

作者：叶丽颖; 彭臻菲; 赵婷婷; 谢富安; 王军凯; 魏碧娜^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2019, 35(04): 333-338.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008808

• 整合酶(IN)
• 双分子荧光互补技术
• 蛋白表达

目的构建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)整合酶(IN)表达载体用于双分子荧光互补技术筛选多肽药物。方法PCR扩增HIV-1 IN的全长基因序列,将目的片段插入至pBiFc-VN173载体中,并对重组质粒pBiFc-VN173-IN进行双酶切及测序鉴定。将重组质粒pBiFc-VN173-IN和对照组质粒pBiFc-VN173分别转染HEK293T细胞,采用Western blot法和免疫荧光细胞化学染色法检测IN的表达。结果通过高保真PCR、载体构建和鉴定,成功获得IN表达载体pBiFc-VN173-IN。与对照组相比,通过Western blot法和免疫荧光细胞化学染色法证实转染质粒pBiFc-VN173-IN载体的HEK293T细胞表达IN。结论成功构建了IN表达载体,该载体可用于和IN相互作用的多肽药物的双分子荧光互补技术筛选。

• 单位
  福建卫生职业技术学院; 厦门大学附属东方医院; 生命科学学院; 厦门大学