益肾生精方治疗少弱精子症的药效评价及作用机制

作者：胡语杰; 徐砚通; 高健; 陈聪; 李佳林; 张偲; 马全涛; 刘逍遥; 王伟玲^*; 王停^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2022, 28(11): 93-101.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220824

• 少弱精子症
• 环磷酰胺
• 氧化应激
• 细胞凋亡
• 性激素
• 五子衍宗丸

目的：采用环磷酰胺致大鼠少弱精子症模型，研究益肾生精方对少弱精子症的治疗作用及作用机制。方法：随机选取8只SD雄性大鼠为正常组，其余大鼠连续5 d腹腔注射环磷酰胺（35 mg·kg~(-1)·d~(-1)）制备大鼠少弱精子症模型，而后随机分为模型组、益肾生精方低、中、高剂量组（2.91、5.83、11.66 g·kg~(-1)），五子衍宗丸组（1.03 g·kg~(-1)），左卡尼汀组（0.17 g·kg~(-1)），每组8只。药物干预28 d后，记录大鼠体质量、睾丸质量和指数；采用计算机辅助精子分析（CASA）系统检测附睾中精子质量；苏木素-伊红（HE）染色观察睾丸组织形态；比色法检测睾丸组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）的水平；原位末端标志法（TUNEL）检测睾丸组织中细胞的凋亡情况；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测睾丸组织中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、活化的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达水平。结果：与正常组比较，模型组大鼠体质量、睾丸质量和指数、精子浓度和活力显著降低（P<0.01），睾丸病理评分显著升高（P<0.01）；与模型组比较，益肾生精方中、高剂量组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可提高体质量、睾丸质量和指数，并提高精子浓度和活力；降低睾丸病理评分。氧化应激水平检测结果显示，与正常组比较，模型组大鼠睾丸组织中SOD水平显著降低（P<0.01）,MDA水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，益肾生精方高剂量组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可以明显提高SOD活性，降低MDA水平（P<0.05,P<0.01）。血清激素水平检测结果显示，与正常组比较，模型组T水平显著降低（P<0.01）,FSH和LH水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，益肾生精方组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可以显著提高T水平（P<0.01），降低LH水平（P<0.05,P<0.01）。TUNEL结果显示，与正常组比较，模型组生精细胞凋亡率显著增加（P<0.01）；与模型组比较，益肾生精方中剂量组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可显著降低凋亡率（P<0.01）。Western blot结果显示，与正常组比较，模型组Bcl-2蛋白水平明显降低（P<0.05）、Bax和cleaved Caspase-3蛋白水平明显升高（P<0.05,P<0.01）；益肾生精方高剂量组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可以明显升高Bcl-2蛋白水平，降低cleaved Caspase-3蛋白水平（P<0.05,P<0.01）。结论：益肾生精方可改善少弱精子症模型大鼠的精子质量，其机制可能与抗氧化、调节性激素水平以及抑制生精细胞凋亡等多个途径有关。

• 单位
  国家中医药管理局; 北京中医药大学