诱导成骨分化过程中BMP与WNT信号通路串话机制

作者:罗高斌; 劳山; 杜刚; 韦达隆; 杨稀仁; 柏彬; 韦华良
来源:广东医学, 2017, 38(24): 3780-3783.
DOI:10.13820/j.cnki.gdyx.20171225.011

摘要

目的探究小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中,BMP-2/Smad信号通路与Wnt/β-catenin通路的串话机制。方法将预先准备好的重组人骨形态发生蛋白-2(rh BMP-2)质粒转染至C3H10T1/2细胞,利用G418抗药性筛查转染成功的细胞。将实验细胞分为转染组、空白组。通过ELISA检测各组细胞上清液中的BMP-2含量,采用Western blot和RT-PCR方法检测两组中Smad泛素化调节因子2(Smurf2)、β-链蛋白(β-catenin)、磷酸化β-链蛋白(pβ-catenin)、转录因子RUNX2、淋巴增强因子1(LEF1)、Axin2、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)等关键细胞因子的表达水平。结果与空白组比较,转染组BMP-2浓度升高并维持在较高水平(P<0.05),β-catenin mRNA的表达上调(P<0.05)和磷酸化水平增加(P<0.01),LEF1蛋白合成上调(P<0.05),Smurf2蛋白表达减少(P<0.05),RUNX2的mRMA表达上调(P<0.01)。结论在成骨细胞分化过程中,BMP-2/Smad信号通路与Wnt/β-catenin通路存在串话机制,增加β-catenin的表达水平,促进β-catenin的磷酸化。

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